PrimeTime qPCR Assay PCR Protocol_?xml_:namespace prefix = o ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:office" /> ÀÌ protocolÀº Primetime qPCR Assay¸¦ »ç¿ëÇÏ´Â »ç¶÷µéÀ» À§ÇÑ °ÍÀÔ´Ï´Ù. ³óµµ¿Í ºÎÇÇ´Â ´Ù¸¥ product¿¡ ÀÇÇØ ´Þ¶óÁú ¼ö ÀÖ½À´Ï´Ù. PrimeTime qPCR Assay Resuspension Protocol 1. ¿î¹ÝµÇ´Â µ¿¾È ¹°ÁúµéÀÌ ºÐ¸®µÈ ¶§´Â Á¦Ç°À» ¿±â Àü¿¡ PrimeTime qPCR Tube¸¦ 750Xg, 10ÃÊ µ¿¾È centrifuge¸¦ µ¹¸³´Ï´Ù. 2. IDTE(100mM Tris, 0.1mM EDTA pH8.0)buffer¿¡¼ÀÇ resuspensionÀÇ ¿ë·®Àº ¾Æ·¡ÀÇ Â÷Æ®¸¦ º¸½Ã¸é µË´Ï´Ù. a. PrimeTime qPCR Assay´Â 40X, 20X ¶Ç´Â 10X ³óµµ¿¡¼ resuspensionÀÌ °¡´ÉÇÕ´Ï´Ù. ÀÌ·¯ÇÑ ¿©·¯ ³óµµ´Â ¾Æ·¡ÀÇ Â÷Æ®¿Í °°Àº final reaction volume ±×¸®°í, AssayÀÇ size¿¡ ÀÇÇØ ´Þ¶óÁý´Ï´Ù. b. °¡Àå È¿°úÀûÀÎ °á°ú¸¦ ¾ò±â À§ÇØ ¼¯¾îÁÝ´Ï´Ù. 3. ResuspensionµÈ Assay¸¦ 750Xg, 10ÃÊ µ¿¾È centrifuge¸¦ µ¹¸³´Ï´Ù. ResuspensionµÈ Assay´Â ¾Æ·¡ÀÇ ¼³Á¤ Á¶°ÇÀÏ ¶§, ÃÖÁ¾ Yield°ªÀº 1XÀÇ 500nM Primers, 250nM Probe°¡ µË´Ï´Ù.
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